固相萃取(SPE)是利用固體吸附劑將樣品中的目標(biāo)化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫,達(dá)到分離和和富集的目的。先使樣品通過(guò)一裝有吸附劑(固相)小柱,保留其中某些組分,再選用適當(dāng)?shù)娜軇_洗雜質(zhì),然后用少量溶劑迅速洗脫,從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。
固相萃取的操作步驟:
針對(duì)填料保留機(jī)理的不同(填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)),操作稍有不同。
目標(biāo)化合物保留模式
固相萃取操作一般有四步:
①活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
?、谏蠘?---將樣品用一定的溶劑溶解,轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。
③淋洗----Z大C度除去干擾物。
④洗脫----用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集。(注意流速不要過(guò)快)
雜質(zhì)保留模式:
固相萃取操作一般有三步:
①活化----除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
?、谏蠘?---將樣品轉(zhuǎn)移入柱,此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出,雜質(zhì)被保留在柱上,故此步驟要開(kāi)始收集。
?、巯疵?---用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集,合并收集液。(注意流速不要過(guò)快)
固相萃取(SPE)使用特點(diǎn):
樣品溶液體系性質(zhì)要與固相萃取要求相適應(yīng)。例如:在C18吸附待測(cè)化合物的模式中,樣品溶液體系中有機(jī)溶劑的比例不能太高;在C18吸附樣品基質(zhì)的模式中,樣品溶液體系中有機(jī)溶劑的比例不能太低。
要注意填料承載能力,防止上樣超載導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。
過(guò)柱流速要合適,不能過(guò)快或過(guò)慢,特別是樣品溶液上柱和洗脫兩個(gè)環(huán)節(jié)的過(guò)柱速度要控制。一般過(guò)柱流速為1~3mL/min。
對(duì)于使用硅膠基質(zhì)的SPE小柱在樣品溶液上柱前不能干涸。如果干涸了應(yīng)該重新對(duì)小柱進(jìn)行活化。